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紫外-可见分光光度法应用

时间:2018-11-27 16:11:19来源:food栏目:检验技术 阅读:

*酸碱指示剂离解常数的测定

分光光度法可以测定酸碱离解常数,若为一元弱酸,在溶液中的离解反应为:

HB ⇌ H+ + B-

若测出 [B-] 和 [HB],就可算出 Ka。测定时,配制出三份不同 pH 的 HB 溶液,一份为强碱性溶液,另一份为强酸性溶液,分别在 B- 和 HB 的吸收峰波长处测定吸光度,由此计算出 B- 和 HB 的摩尔吸光系数。第三份为已知 pH 值的缓冲液,其 pH 值在 pKa 附近,在测得 B- 和 HB 的总吸光度后用双组分测定的方法算出 B- 和 HB 的浓度,即可计算出弱酸的离解常数。

由 pH = pKa

可知,当 [B-] 和 [HB] 相等时: pKa = pH

若以 pH 为横坐标,以某波长处测得的不同 pH 时的 A 为纵坐标作图,得一条 S 形曲线,该曲线的中点所对应的 pH 即为 pK 值。

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